来自Bacillus licheniformisIBRL-CHS2的新型1.4脂酶亚家族的表征:克隆和表达优化
Ammar Khazaal Kadhim Almansoori1,2, Nidyaletchmy Subba Reddy1, Mustafa Abdulfattah1,3
1School of Biological Sciences, Universiti Sains Malaysia, Gelugor, Penang, Malaysia.
PloS one
|December 17, 2024
概括
一种来自Bacillus licheniformis的新型脂酶成功地被表达和净化. 这种酶在35°C和pH7时表现出最佳活性,在有机溶剂中具有显著的稳定性,使其在工业上具有重要意义.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 脂酶是各种工业应用中的关键酶.
- 探索具有独特性质的新型脂酶对于扩大它们的实用性至关重要.
- 菌是已知的工业相关酶的来源.
研究的目的:
- 克隆,表达和表征一种来自Bacillus licheniformisIBRL-CHS2.2.的新型脂酶.
- 确定酶活性和稳定性的最佳条件.
- 评估脂酶在工业应用中的潜力,特别是在有机合成中.
主要方法:
- 将基因克隆到pGEM-T易向量中,并使用pCold I向量在大肠杆菌BL21 (DE3) 中表达.
- 通过亲和性染色谱净化His标记的脂酶.
- 酶活性在不同温度,pH值以及有机溶剂,金属离子和表面活性剂的存在下进行测定.
主要成果:
- 脂酶基因被成功克隆和表达,在15°C以内24小时使用0.2mM异烯β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) 的最佳表达.
- 纯化脂酶的特异性活性增加了13倍 (331.3U/mg),并且在35°C和pH 7.0下具有最佳活性.
- 该酶在各种有机溶剂 (异 octane,n-hexane,DMSO,甲醇) 中表现出显著的稳定性和增强活性,并且在几个双价离子和非离子表面活性剂中稳定.
结论:
- 来自Bacillus licheniformis的新型脂酶IBRL-CHS2在有机溶剂中具有强大的稳定性,并耐受各种化学条件.
- 它对C12:0脂肪酸的高度亲和力和与子油的良好性能表明它在化和水解反应中的潜力.
- 该酶的独特特性使其成为生物催化剂,有机合成和各种工业过程中应用的有希望的候选者.


