通过可扩展的两步单体色谱方法来净化AAV8

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 基因治疗 基因治疗
• 染色体学 染色体学 是一种染色学.

背景情况:

• 腺相关病毒 (AAV) 是关键的基因传递载体.
• 目前的制造工艺需要提高可扩展性和灵活性.
• 工程体需要先进的净化策略.

研究的目的:

• 设计和评估AAV8净化两步单质色谱过程.
• 评估阴离子交换和各种单质联体的捕获和抛光效率.
• 建立一个可扩展和强大的AAV净化方法.

主要方法:

• 设计了一种使用单质介质的两步染色学过程.
• 交换色谱 (CIMmultus® SO3) 用于捕获.
• 对离子交换和多式联体 (CIMmultus® QA,PrimaS,PrimaT) 进行了抛光评估.

主要成果:

• 阴离子交换捕获步骤实现了~70%的AAV8恢复,其中≥95%的蛋白质和≥80%的DNA被移除.
• 抛光步骤证明了高病毒载体基因组恢复和纯度.
• 实现了全体的三倍丰富,并证实了可扩展性.

结论:

• 开发的两步单体色谱为传统的AAV净化提供了强大的和可扩展的替代方案.
• 这种方法支持在基因治疗中对AAV载体的需求日益增加.
• 单质色谱为AAV制造提供了一个高效的平台.