来自Mycolicibacterium smegmatis的双重功能α-二氧化酶/过氧化酶的表达,净化和特征

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 酶学 是一种酶学.
• 微生物学 微生物学

背景情况:

• 前列腺素H合成酶 (PGHS) 酶在哺乳动物生理学中至关重要.
• 细菌中PGHS同类的存在和功能在很大程度上仍未被探索.
• 了解细菌脂质代谢,可以了解进化途径.

研究的目的:

• 描述来自actinobacterium Mycolicibacterium smegmatis的假定前列腺素H合成酶 (PGHS).
• 为了阐明这种细菌PGHS同类的酶活性和基质特异性.
• 调查细菌和哺乳动物PGHS之间的潜在进化联系.

主要方法:

• 再组合 (his) 6标记的M. smegmatis酶的表达和净化.
• 使用和和不和脂肪酸作为基质的酶分析.
• 使用染色学和质谱学分析反应产品.

主要成果:

• 纯化的M. smegmatis酶表现出双重的二氧化酶和过氧化酶活动.
• 该酶催化脂肪酸在α-碳酸盐位置的氧化,形成2-氧脂肪酸.
• 基质氧化之后是需要电子捐赠者的还原阶段,也观察到较小的脱碳氧化产物.

结论:

• 梅格马蒂斯菌的酶代表了一种具有PGHS类活性的新型细菌脂质修饰酶.
• 这种酶的双重功能在已知的细菌脂类二氧化原酶中是不寻常的.
• 这些发现表明哺乳动物PGHS的潜在细菌前体,为酶进化提供了洞察力.