一个miR-219-5p-bmal1b负反循环有助于斑马鱼的昼夜调节

科学领域:

• * 循环时间生物学
• * 分子神经科学 * 分子神经科学
• * 斑马鱼模型生物

背景情况:

• * 微RNA (miRNA) 是参与各种生物过程的基因表达的关键转录后调节者.
• * 循环节律,内源的~24小时周期,控制生理和行为模式.
• *miRNAs在调节昼夜节律中的作用,特别是在斑马鱼中,在很大程度上仍未被探索.

研究的目的:

• * 研究特定的微RNAs (miRNAs) 在斑马鱼的昼夜节律调节中的参与.
• *阐明miRNAs影响斑马鱼大脑中昼夜钟功能的分子机制.

主要方法:

• *定量实时PCR (qRT-PCR) 用于评估miRNA表达模式.
• *基因删除和淘汰技术 (例如,CRISPR/Cas9,反意义寡核酸) 来研究功能后果.
• *RNA免疫沉 (RIP) 试验,miRNA拉下试验和光酶记者试验以确认目标相互作用.
• * 运动活动监测和转录组分析 (RNA-seq) 以评估昼夜表型和分子变化.

主要成果:

• *确定了成熟的miR-219-5p及其前体 (mir-219-1,mir-219-2,mir-219-3) 在特定的斑马鱼大脑区域 (TeO,CCe,CC) 的节奏表达.
• * 证明mir-219-1和mir-219-2是时钟调节的,而mir-219-3是光调节的.
• * 表明,对mir-219基因的破坏或对miR-219-5p的破坏缩短了运动节律周期,并提高了bmal1b的调节.
• *确认miR-219-5p通过结合其3'未翻译区域 (3'UTR) 直接向并抑制bmal1b的表达.
• *转录组分析表明miR-219-5p在光传导和神经活性联体受体相互作用中的作用.

结论:

• * mir-219基因集群是由斑马鱼大脑中的昼夜钟和光线线索差异调节的.
• *miR-219-5p通过向和抑制核心时钟组件bmal1b,在昼夜调节中发挥关键作用.
• * 在斑马鱼的昼夜循环中建立了一个新的miR-219-5p-bmal1b负反循环.
• *强调了miRNA介导调节在维持稳健的昼夜节律方面的重要性.