快速视觉检测红海伊里多病毒使用一种基于交叉化放大功率的横向流量试验

科学领域:

• 水生动物卫生 水生动物卫生
• 分子诊断学 分子诊断
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 红海伊利多病毒 (RSIV) 导致每年大量的鱼类死亡,特别是在亚洲,在高水温下.
• 有效的疾病控制需要快速和敏感的病毒检测方法.
• 分子诊断通过遗传材料分析提供有效的病原体鉴定.

研究的目的:

• 开发和验证可在现场部署的基于交叉启动放大的侧向流量试验 (CPA-LFA) 进行RSIV检测.
• 创建一个具有短交付时间和现场使用的简单程序的诊断工具.

主要方法:

• 优化CPA-LFA反应条件,包括MgSO4,dNTP和贝他因度,并在60°C60分钟内进行化.
• 对常见鱼类病原体进行特异性测试.
• 确定检测极限 (LOD95%) 并与传统的聚合酶链反应 (PCR) 进行比较.
• 在210个鱼样 (培养和人工感染) 上使用定量PCR (qPCR) 验证.

主要成果:

• 优化的CPA-LFA专门检测到RSIV,没有交叉反应.
• 检测极限 (LOD95%) 为385.76副本/μL,与PCR可比.
• 与qPCR相比,CPA-LFA显示出高诊断灵敏度 (94.34%) 和完美的特异性 (100%).
• 运营商间可重复性显示卡帕值为1.0,表明完全一致.

结论:

• 开发的CPA-LFA是RSIV的可靠和准确的分子诊断工具.
• 它的简单程序和快速结果使它非常适合现场诊断.
• 这种检测可以显著帮助及时控制水产养殖中RSIV爆发.