在植入物表面上对M1和M2人类单细胞衍生的巨细胞的极化和表征
Leila Mohammadnejad1, Hannah Conrady1, Madeline Mangold1
1Department of Medical Materials Science & Technology, Institute for Biomedical Engineering, University Hospital Tübingen.
Journal of visualized experiments : JoVE
|December 23, 2024
概括
这项研究引入了一种新的体外方法,使用初级单细胞衍生的巨细胞来评估植入物质相互作用. 这些发现确定了M1和M2巨细胞亚型的特定标记物,对于评估植入物免疫调节潜力至关重要.
科学领域:
- 生物材料科学 生物材料科学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 外体反应 (FBR) 对于植入物集成至关重要,涉及调节炎症和再生的巨细胞.
- 了解巨细胞-植入物相互作用需要可靠的体外模型.
- 主要单细胞衍生巨细胞 (MDMs) 为研究这些相互作用提供了一个强大的模型.
研究的目的:
- 实施和验证一个实验协议,用于评估植入物表面上的巨细胞极化.
- 确定可靠的标记物,以区分M1 (促炎) 和M2 (抗炎/再生) 巨细胞亚型,以应对植入物材料.
主要方法:
- 从健康的捐赠者中分离出单细胞,并使用巨细胞殖民地刺激因子 (M-CSF) 将其分化为巨细胞.
- 在植入物表面培养巨细胞并诱导M1偏振 (IFN-γ,LPS) 或M2偏振 (IL-4,IL-13).
- 使用ELISA,CLSM和qRT-PCR评估巨细胞表型,分析细胞因子分泌,表面标记物和基因表达.
主要成果:
- 确定了CCR7和TNF-α作为M1巨细胞的特定标记物.
- 确定了CD209和CCL13作为M2巨细胞的特定标记物.
- 通过免疫染色,CLSM和ELISA验证标记特异性,证实差异性表达模式.
结论:
- 开发的实验设置和已识别的标记物 (CCR7,CD209) 对于评估植入物表面上的巨细胞极化是有效的.
- 该协议提供了一种可靠的方法来评估生物材料和植入物的免疫调节潜力.
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