为基因组编辑而合理设计的亲蛋白和穿透膜的α-螺旋型多,用于朝着胆道新血管化治疗的基因组编辑

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 眼科医生 眼科 眼科

背景情况:

• 克里斯普尔/卡斯9基因组编辑显示出治疗胆道新血管化 (CNV) 的前景.
• 能有效地将蛋白质输入细胞质中仍然是治疗应用的重大挑战.
• 现有的方法往往在货物的完整性和细胞吸收方面扎.

研究的目的:

• 设计一种新的系统,可对蛋白质货物进行强大的和通用的细胞质输送.
• 为了使基于核蛋白 (RNP) 的CRISPR/Cas9能够有效地用于基因组编辑.
• 为了证明CNV和相关的眼睛疾病的治疗潜力.

主要方法:

• 具有三酸盐 (ATP) 标签的可逆化前蛋白 (P蛋白) 的工程设计.
• 结合P蛋白与穿透膜的多 (LGP) 形成纳米复合体 (NCs).
• 利用LGP的膜活性进行细胞内化和内溶体逃生.
• 已证明P蛋白生物活性的内溶酶体酸度触发的恢复.
• 在CNV小鼠模型中,使用LGP/P-RNPNC向低氧诱导因子-1α (HIF-1α).

主要成果:

• 在保持生物活性的同时,实现了多种蛋白质载荷的高效细胞溶液传递.
• LGP/P-RNP NCs促进了细胞吸收和内解酶体逃逸.
• 内输送向的NCs导致了显著的基因破坏.
• 观察到对亲血管性因素的降低调节和亚皮纤维化缓解.
• 在CNV的小鼠模型中证明了强大的治疗疗效.

结论:

• 开发了一个易于使用和多功能平台,用于细胞质蛋白传递和基因组编辑.
• 该工程系统克服了当前蛋白质输送工具的局限性.
• 这种方法对治疗中枢性黄斑病毒和与年龄相关的黄斑变性有显著的前景.