基于三醇和曼尼托尔的Taq DNA聚合酶的冷保护,用于无冷链的长期储存
Jian Jin1, Yuyu Zeng1, Xinyu Gao1
1Jiangsu Key Laboratory of Marine Pharmaceutical Compound Screening, Jiangsu Key Laboratory of Marine Biological Resources and Environment, Co-Innovation Center of Jiangsu Marine Bio-industry Technology, School of Pharmacy, Jiangsu Ocean University, Lianyungang 222005, China.
Journal of pharmaceutical sciences
|December 26, 2024
概括
这项研究使用优化的冷干燥开发了Taq DNA聚合酶和HS-Taq Mix的稳定,固体配方. 这些配方可以在环境温度下进行储存和运输,保持酶活性和PCR放大效率.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 聚合酶链反应 (PCR) 对于核酸分析至关重要,但需要冷链储存 (-20°C) 试剂.
- 目前的冷链要求限制了PCR试剂在各种环境中的可访问性和可用性.
研究的目的:
- 开发Taq DNA聚合酶和5 × HS-Taq混合物的稳定,固体配方,用于环境温度储存和运输.
- 优化冷干燥工艺和冷保护剂配方,以提高试剂稳定性.
主要方法:
- 优化了冷干燥工艺,使用三二酸盐 (3.35%) 作为冷和冷保护剂和曼尼托尔 (10%) 作为填充剂.
- 使用SEM,PXRD,DSC和TGA对冷解样本的表征.
- 通过实时定量PCR (qPCR) 评估酶活性和长期稳定性,在37°C和55%RH下保存12周后.
主要成果:
- 成功制备了Taq DNA聚合酶和5 × HS-Taq混合物的稳定固体配方.
- 三二酸盐形成无形结构,而曼尼托尔结晶,有助于稳定.
- 经过冷干燥的样本保留了高的酶活性和放大效率,与在加速条件下长时间储存后的新鲜样本相比.
结论:
- 优化的冷干燥和冷保护剂配方使环境稳定的PCR试剂的开发成为可能.
- 这一进步促进了PCR试剂的储存和运输,可能扩大其在资源有限的环境中的使用.
- 开发的固体配方保持了Taq DNA聚合酶和HS-Taq Mix.的完整性和性能.
