从10年前的血液样本中分离出RNA-Seq的高质量RNA

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 生物银行和样本保存

背景情况:

• RNA分析,特别是RNA测序,在研究和诊断中至关重要.
• 由于RNA的不稳定性,需要强大的存储和隔离方法来保持完整性.
• 长期,具有成本效益的血液样本存储与最小的体积是理想的,大集合.

研究的目的:

• 评估从长期存储的血液样本中分离高质量的RNA的可行性.
• 评估一种改进的RNA分离协议,以改善RNA完整性.
• 为了比较长期存储样品的RNA质量与新鲜样品.

主要方法:

• 血液样本 (EDTA和酸盐) 在Boom的溶解缓冲器中在-85°C下保存了10年.
• 用修改的Zymo研究快速RNA套件协议分离RNA.
• 评估了RNA完整性和质量,并进行了RNA测序.

主要成果:

• 从存储了10年的血液样本中成功分离出适合转录组学的高质量RNA.
• 与原来的Boom方法相比,修改后的Zymo研究协议显著改善了RNA完整性.
• RNA测序产生了高质量的数据,与使用最近收集的血液的研究相提并论.

结论:

• 长期存储血液在Boom的溶解缓冲器中,温度为-85°C,可保存RNA进行高质量的下游分析.
• 一个经过修改的Zymo Research快速RNA套件协议提供了一种有效的方法,用于从老化样本中分离RNA.
• 这种方法支持大规模的生物银行和RNA测序计划.