唾液细胞外囊泡隔离方法会影响下游生物标志物检测的稳定性

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分子生物学分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 细胞外囊泡 (EVs) 是细胞通信的关键,参与健康和疾病.
• 唾液中含有EVs,使它们成为非侵入性诊断的吸引力.
• 缺乏标准化的唾液EV隔离方法,阻碍了研究.

研究的目的:

• 为了比较共沉和免疫亲和方法与超离心法用于唾液EV隔离.
• 评估预先过对唾液EV分析的影响.
• 为了突出唾液EVs的诊断潜力.

主要方法:

• 对EV隔离技术的比较分析:共同沉,免疫亲和和超离心.
• 使用冷电子显微镜 (Cryo-EM),纳米粒子追踪分析,西方斑点 (WB) 和蛋白质组学进行了表征.
• 通过RT-qPCR进行miRNA分析.

主要成果:

• 观察到EV大小,度和蛋白质含量的方法依赖的变化.
• 通过EV隔离,WB.能够检测到WB.在整个唾液中错过的生物标志物.
• 在所有方法中,miRNAs在EV货物中得到了持续的丰富.
• 过前的唾液样本对后续分析产生了负面影响.

结论:

• 唾液EV具有重要的,但尚未开发的诊断潜力.
• 推共同沉作为一种高效,具有成本效益的方法来隔离唾液EV.
• 这项研究支持在常规临床诊断中使用唾液EV.