跨核CRISPR/Cas9:可食中基因组编辑的安全方法,不包括外来DNA序列
Daishiro Koshi1, Junko Sugano1, Fuga Yamasaki1
1Graduate School of Agriculture, Kyoto University, Sakyo-Ku, Kitashirakawaoiwakecho, Kyoto, 606-8502, Japan.
Applied microbiology and biotechnology
|December 31, 2024
概括
这项研究引入了使用CRISPR/Cas9.9的Pleurotus ostreatus的新型,无外来DNA的基因组编辑方法. 这种技术可以在中进行高效的基因编辑,而不会产生转基因生物 (GMO).
科学领域:
- 菌群学 菌群学 菌群学是指菌群学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- CRISPR/Cas9基因组编辑对食用真菌的繁殖有价值,但由于外来DNA的整合,它引发了GMO的担忧.
- 开发没有外来DNA的方法对于法规遵守和消费者接受真菌生物技术至关重要.
研究的目的:
- 建立一个高效的,没有外来DNA的 Pleurotus ostreatus 的基因组编辑协议.
- 解决在真菌繁殖中对转基因生物 (GMO) 的担忧.
主要方法:
- 开发了一种通过核的CRISPR/Cas9传递系统,用于二核生物Pleurotus ostreatus.
- 为了选择编辑的菌株,利用了 uracil 辅和 5-FOA 耐药性.
- 使用基因组PCR,南方涂抹和全基因组复序证实没有外来DNA.
主要成果:
- 在没有整合外源DNA的情况下,在P. ostreatus中成功实现了基因组编辑.
- 在编辑后生成的单核细胞分离物无外来DNA序列.
- 在agaricomycetes中证明了CRISPR/Cas9跨核方法的效率.
结论:
- 这项研究介绍了第一个没有外来DNA的基因组编辑协议,用于agaricomycetes.
- 该方法促进了真菌中更安全的分子繁殖,避免了转基因生物的担忧.
- 这种方法可能适用于其他具有 dikaryotic 生命周期的真菌.
