在含有fos-EGFP的TetTag小鼠中出现异常c-Fos表达
Jacob H Wilmot1,2, Tracy L Warren2,3,4, Cassiano R A F Diniz2
1Department of Psychology, University of California, Davis, Davis, CA, United States.
Frontiers in behavioral neuroscience
|January 1, 2025
概括
杰克逊fos-tTA/fos-shEGFP小鼠模型显示海马中c-Fos水平因c-Fos-GFP融合蛋白而膨胀,而不是增加神经活动. 这件文物限制了其用于研究engram细胞的用途.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 遗传学 是一个
背景情况:
- 恩格拉姆细胞,神经元在特定经验中活跃,使用遗传工具研究,如fos-tTA转基因小鼠 (TetTag).
- 恩格拉姆细胞的重新激活通常通过测量即时早期基因表达 (IEG) 来评估.
- 存在两种TetTag鼠标系:一种具有fos-tTA,另一种 (杰克逊实验室) 具有fos-tTA和fos-shEGFP.
研究的目的:
- 为了比较两个不同的 fos-tTA 转基因小鼠系中的直接早期基因 (IEG) 表达.
- 为了调查杰克逊实验室小鼠系列中意想不到的c-Fos表达水平的原因.
主要方法:
- 在Jackson fos-tTA/fos-shEGFP和使用免疫组织化学 (IHC) 的野生类型小鼠中检查了即时早期基因 (IEG) 表达 (c-Fos,Arc,Egr-1).
- 使用定量PCR (qPCR) 来分析mRNA水平的基因表达.
- 评估了两种小鼠线的行为结果,包括恐惧表达和记忆.
主要成果:
- 杰克逊fos-tTA/fos-shEGFP小鼠通过IHC表现出明显更高的海马c-Fos水平,与野生型小鼠相比.
- 其他IEGs (Arc,Egr-1) 和行为措施 (恐惧,记忆) 的表达在两个小鼠线之间是可比的.
- qPCR证实了杰克逊小鼠中的c-Fos-Exon1-GFP融合mRNA的存在,这表明它会导致膨胀的c-Fos IHC信号.
结论:
- 杰克逊fos-tTA/fos-shEGFP小鼠系列呈现出c-Fos的人工升高,可能是由于c-Fos-GFP融合蛋白.
- 这种文物似乎不会影响总体的神经刺激性或与恐惧记忆相关的行为结果.
- 研究人员在使用杰克逊 fos-tTA/fos-shEGFP 鼠标系用于 engram 细胞研究时,应该意识到这一局限性.
