用ID-LC-MS/MS对基与基于蛋白质的校准进行心脏素I量化的比较评估
Meltem Asicioglu1,2,3, Claudia Swart4, Evren Saban1
170777 TUBITAK National Metrology Institute (TUBITAK UME) , Kocaeli, Türkiye.
Clinical chemistry and laboratory medicine
|January 2, 2025
概括
一种使用同位素稀释液体染色学-并联质谱法 (ID-LC-MS/MS) 的新方法准确测量了血清中的心脏素I (cTnI). 与蛋白质校准相比,类校准显示了潜在的偏差与低丰度蛋白质的蛋白质校准相比.
科学领域:
- 生物化学和分析化学的研究.
- 质谱测量质量谱测量
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
背景情况:
- 在复杂的生物基质中,准确量化低丰富的蛋白质,如心脏素I (cTnI),对于临床诊断至关重要.
- 现有的蛋白质量化方法在实现SI可追溯性和准确性方面面临挑战.
- 开发强大的分析协议对于计量学界来说至关重要,以实现新的校准器.
研究的目的:
- 开发和验证一种同位素稀释液体色谱-并联质谱法 (ID-LC-MS/MS) 方法,用于使用基于的校准来确定cTnI.
- 为了比较基于的校准与传统基于蛋白质的校准的性能,用于cTnI量化.
- 评估复杂矩阵中蛋白质量化的新方法,并支持SI可追溯校准器的开发.
主要方法:
- 开发一个ID-LC-MS/MS分析协议,并采用基于的校准策略.
- 确定绝对含量使用杂质校正氨基酸分析 (PICAA) 来确定SI可追溯性.
- 使用微珠和纳米珠,利用人类血清中cTnI的免疫亲和丰富,优化消化参数.
主要成果:
- ID-LC-MS/MS方法在0.9-22.0μg/L.L.范围内证明了对cTnI定量化的选择性和特异性.
- 高精度实现了中等精度RSD<28.9%和可重复性RSD<5.8%,恢复率在87%-121%之间.
- 与基于蛋白质的校准相比,基于的校准显示了恢复率的显著定量偏差,尽管LOQ值相似.
结论:
- 开发的ID-LC-MS/MS方法与校准成功量化了人类血清中的cTnI.
- 与基于蛋白质的校准进行比较,发现了基于的低丰富蛋白质量定量的基于的策略的优点和局限性.
- 该研究有助于推进蛋白质量化方法和SI可追溯校准器的开发.
