使用简单的模板LAMP检测方法快速检测入侵的西红叶矿工Phthorimaea absoluta

科学领域:

• 农业昆虫学 农业昆虫学
• 分子诊断学 分子诊断
• 侵袭性物种管理 侵袭性物种管理

背景情况:

• 番茄叶矿工 (Phthorimaea absoluta) 是一个重要的入侵性害虫,在全球范围内造成广泛的作物损害.
• 准确和快速识别P. absoluta对于有效的害虫控制策略和生物安全至关重要.
• 现有的诊断方法可能缺乏及时干预所需的速度或特异性.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的循环介导同热放大 (LAMP) 试验,用于快速准确地检测Phthorimaea absoluta.
• 评估开发的TLM-LAMP试验的灵敏度,特异性和现场适用性.
• 提供一种分子工具,以帮助监测和管理番茄叶矿工感染.

主要方法:

• 一个LAMP试验 (TLM-LAMP) 旨在准P. absoluta.的线粒体细胞氧化酶子单元I (COI) 基因.
• 测试的特异性是针对密切相关的非目标昆虫物种进行测试的.
• 使用不同度的P. absoluta DNA和等离子体DNA来确定灵敏度.
• 实验室和实地试验使用不同的生命阶段和原始昆虫提取物进行.

主要成果:

• 在65°C的TLM-LAMP测定成功地在60分钟内确定了P. absoluta.
• 证实了高特异性,没有观察到对测试的非目标物种的交叉反应.
• 该试验显示出高灵敏度,检测到P. absoluta的DNA到1 × 10−8 ng/μL.
• 现场验证使用来自费洛蒙陷的原始昆虫提取物证实在45分钟内成功检测.

结论:

• 开发的TLM-LAMP试验是一种敏感,特异性和快速的分子工具,用于检测Phthorimaea absoluta.
• 该试验适用于实验室和现场应用,包括使用简单的原始昆虫提取物.
• TLM-LAMP为监测入侵性害虫和支持农业生物安全响应提供了宝贵的进步.