基于循环介导的异热放大工作流程,用于检测和血清定型Salmonella spp. 在环境家禽群体样本中
Patricia Regal1, Anne Doval1, Iria García-Ramos1
1Food Hygiene, Inspection and Control Laboratory (LHICA-USC), Department of Analytical Chemistry, Nutrition and Bromatology, Faculty of Veterinary Science, Campus Terra, Universidade de Santiago de Compostela (USC), 27002 Lugo, Spain.
Foods (Basel, Switzerland)
|January 8, 2025
概括
一种新的循环介导异热放大 (LAMP) 方法快速选肉养殖场靴子抹布中的沙门氏菌. 这种方法为在家禽环境中有效控制沙门氏菌提供了高精度和特异性.
科学领域:
- 食品安全 食品安全
- 微生物学 微生物学
- 兽医科学 兽医科学 兽医科学
背景情况:
- 沙门氏菌 spp. 沙门氏菌 是一种主要的食源性病原体,家禽养殖场是人类感染的主要来源.
- 目前在农场环境中检测沙门氏菌的培养依赖方法是耗时的.
- 快速准确的检测方法对于有效控制家禽生产中的沙门氏菌至关重要.
研究的目的:
- 开发一种新的,快速循环介导的异热放大 (LAMP) 方法,用于沙门氏菌 spp. 在肉养殖场的查 靴子抽样样本.
- 评估和优化用于现场农场分析的DNA提取协议.
- 开发一种特定于血清型的LAMP面板,用于识别主要的沙门氏菌血清型.
主要方法:
- 开发和验证一种循环介导的异热放大 (LAMP) 试验对沙门氏菌 spp.
- 评估四种DNA提取方法 (热溶解,Chelex,磁珠).
- 实验室间测定,裸眼色度测定和实时放大与溶解曲线分析用于血型鉴定.
主要成果:
- 开发的LAMP方法实现了1.8CFU/25g的检测极限50 (LoD50),具有高灵敏度 (95.7%),特异性 (100%) 和精度 (96.6%).
- 该方法与ISO标准有很好的一致性 (科恩的卡帕=0.9).
- 一个血清定型小组成功地通过曲线分析确定了主要的沙门氏菌血清型 (S. Typhimurium,S. Enteritidis,S. Infantis,S. Hadar,S. Virchow).
结论:
- 一种基于LAMP的快速而准确的沙门氏菌查方法. 非常适合在农场应用,已成功开发出来.
- 这项研究为加强家禽养殖场的沙门氏菌控制策略提供了宝贵的工具.
- 开发的血清型定型小组可在实验室环境中有效识别关键的沙门氏菌血清型.
