在Epicauta gorhami (Coleoptera: Meloidae) 中用于qRT-PCR分析的稳定基因的查和验证
Guofeng Yang1, Xuetao Yu1, Yan Zhang1
1Key Laboratory of Agricultural Genetically Modified Organisms Traceability, Oil Crops Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Science/Supervision and Test Center (Wuhan) for Plant Ecological Environment Safety, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Wuhan 430062, China.
这项研究确定了在大豆害虫Epicauta gorhami中进行基因表达分析的最稳定的家政基因. 对于对这种昆虫进行精确的qRT-PCR研究,建议使用SOD,RPS18和RPS28.
科学领域:
- 昆虫学 昆虫学是一门学科.
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 遗传学 是一个
背景情况:
- Epicauta gorhami是一种大豆害虫,其基因功能研究因缺乏合适的参考基因而受到限制.
- 精确的基因表达分析依赖于选择稳定的家政基因进行正常化.
研究的目的:
- 在Epicauta gorhami.中识别和验证用于定量实时PCR (qRT-PCR) 最稳定的家政基因.
- 建立可靠的基因参考基因基因表达研究在不同的成年人年龄,组织和温度.
主要方法:
- 使用定量实时PCR (qRT-PCR) 来评估10个候选家政基因的表达稳定性.
- 用五种计算工具 (Ct值,geNorm,NormFinder,BestKeeper,RefFinder) 来进行全面的稳定性分析.
- 使用验证的参考基因分析了EgUAP的表达.
主要成果:
- SOD和RPS18被确定为不同成人年龄和温度的最稳定的参考基因.
- RPS18和RPS28的组合被证明是分析不同成年组织的基因表达的最可靠方法.
- 发现EgUAP表达在前肠,气管和天线中高,在中肠,后肠和表皮中低.
结论:
- SOD,RPS18和RPS28已被验证为Epicauta gorhami中的qRT-PCR可靠的家庭基因.
- 这些发现为未来对这种昆虫害虫的分子和功能基因组研究提供了重要的基础.
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