开发多重测试,用于识别动物感染的贝贝西亚物种
Ana Cláudia Calchi1, Charlotte O Moore2, Lillianne Bartone2
1Vector-Borne Bioagents Laboratory (VBBL), Department of Pathology, Reproduction and One Health, School of Agricultural and Veterinarian Sciences (FCAV), São Paulo State University (UNESP), Jaboticabal CEP 14884-900, Brazil.
Pathogens (Basel, Switzerland)
|January 8, 2025
概括
这项研究开发了使用巴贝西亚内部转录区域 (ITS) 的新分子测定方法,以准确诊断动物感染的巴贝西亚物种. 这些测试有效地检测到人类血液样本中的单一和并发感染,改善了Babesia诊断.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 医学昆虫学 医学昆虫学
背景情况:
- 目前已有100多种贝贝西亚菌种,其中8种会在人类中引起新出现的动物病.
- 目前使用18S rRNA基因的诊断方法因其保存性而与物种级别的差异化作斗争.
- 高度可变的内部转录区域 (ITS) 为准确的巴贝西亚鉴定提供了一个有前途的替代方案.
研究的目的:
- 测序和分析各种Piroplasmida物种的完整的ITS1和ITS2区域.
- 开发基于PCR的敏感和特定的测定方法,用于诊断四种主要的动物传染性巴贝西亚物种.
- 评估这些新型测试在检测人类血液样本中巴贝西亚DNA的有效性.
主要方法:
- 从各种Piroplasmida物种中对ITS1和ITS2区域进行测序.
- 设计和优化单复合和多复合常规 (c) PCR,定量实时 (q) PCR和数字 (d) PCR测定,以ITS1.1为目标.
- 使用人类血液中的DNA和丰富血液培养物的测试验证,包括与DNA测序进行比较.
主要成果:
- 新的PCR测定表明,对Babesia分歧,Babesia odocoilei,Babesia duncani和Babesia microti具有很高的灵敏度和特异性.
- 检测成功地检测到巴贝西亚DNA在低拷贝数 (10^-1到10^-2DNA拷贝/μL) 的情况下,没有交叉放大.
- 在人类样本中,检测到单个感染,DNA测序证实了7.3%的病例的共感染,表明总流行率为26.8%.
结论:
- 开发的基于ITS的PCR测定是准确的物种级别动物性Babesia诊断的有效工具.
- 这些协议有助于在人类中检测单个和多个Babesia物种感染.
- 这些发现有助于改善新出现的和诊断不足的Babesia动物病的诊断.
