使用成像生成和表征鼻上皮模型的协议,用于呼吸道病毒.
Victor H K Lam1, Aleena Ghafoor1, Yazan Khan1
1Department of Microbiology and Immunology, Schulich School of Medicine & Dentistry, Western University, London, ON, Canada.
STAR protocols
|January 8, 2025
概括
这项研究详细介绍了使用空气-液体接口 (ALI) 培养用于严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2) 研究的鼻上皮细胞培养的协议. 该方法解决了成像,粘液检测和体外病毒定量方面的挑战.
科学领域:
- * 呼吸系统生物学
- * 病毒学 病毒学
- * 细胞培养技术
背景情况:
- * 空气-液体接口 (ALI) 培养模型 呼吸道上皮细胞 in vitro.
- * 严重急性呼吸道综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2) 需要强大的体外模型进行研究.
- * 鼻组织提供了初级气道上皮细胞的来源.
研究的目的:
- * 提出一个关于分离和培养人类鼻上皮细胞的详细方案.
- *为了使这些细胞适应用于空气-液体接口 (ALI) 培养.
- * 为了使用这些初级细胞模型进行SARS-CoV-2感染研究.
主要方法:
- *从轮状组织中分离出鼻上皮细胞.
- * 建立空气液体接口 (ALI) 文化.
- * 优化成像,粘液检测和细胞内病毒定量技术.
主要成果:
- * 鼻上皮细胞的成功隔离和ALI培养.
- * 已确立的成像脆弱ALI培养的方法.
- * 已证明可以检测出粘液的产生以及细胞内SARS-CoV-2的量化.
- *为实验提供了关于最佳ALI成熟时间的数据.
结论:
- * 本方案有助于生成鼻气道上皮的功能性体外模型.
- *此模型适用于调查SARS-CoV-2感染动态.
- * 该协议为优化呼吸道病毒研究中的特定实验假设提供了灵活性.


