在大鼠血清中同时量化DS001的总抗体和结合有效载荷,使用混合免疫捕获LC-MS/MS
Xiong Yu1,2, Weiqiang Li2,3, Wensi Huang2,3
1School of Medicine and Pharmacy, Ocean University of China, Qingdao, 266003, China.
The AAPS journal
|January 8, 2025
概括
这项研究开发了一种快速混合免疫亲和LC-MS/MS方法,用于定量抗体-药物合物 (ADC) 及其有效载荷. 经过验证的试验准确地测量了在老鼠中对DS001的药理动力学分析的总抗体和结合有效载荷.
科学领域:
- 生物分析化学 生物分析化学
- 药理动力学 药理动力学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 抗体-药物合物 (ADC) 对药物动力学 (PK) 分析提出了生物分析方面的挑战.
- 为了全面的ADC表征,通常需要多种方法.
研究的目的:
- 建立一个快速和灵敏的混合免疫亲和LC-MS/MS试验,同时量化DS001的总抗体和合有效载荷.
- 为了能够在PK研究期间监测药物与抗体比率 (DAR) 的波动.
主要方法:
- 开发了一种混合免疫亲和LC-MS/MS方法用于DS001分析.
- 样品的制备包括免疫捕获,变性,素和帕帕因消化 (<4小时).
- 在大鼠血清中验证了总抗体和结合有效载荷的方法.
主要成果:
- 该方法证明了从100 ng/mL到100,000 ng/mL的总抗体和3.495 ng/mL到3495 ng/mL的结合有效载荷的线性.
- 实现了高相关系数 (r > 0.990) 和可接受的精度/准确性.
- 在静脉注射后,成功地应用了测量方法来量化大鼠的DS001 PK.
结论:
- 开发的LC-MS/MS试验适合在ADC PK研究中同时量化总抗体和合有效载荷.
- 这种方法促进了对DAR的监测,并提供了全面的药理动力学见解.
- 快速的样本制备和敏感的检测使ADCs的有效生物分析成为可能.
