通过Pepper光RNA对与FUS病理聚合物相关的圆形和长非编码RNA的活细胞成像

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学
• 在RNA生物学,RNA生物学.

背景情况:

• 在RNA可视化方面的进步对于理解细胞功能至关重要.
• 在活细胞中研究非编码RNA (ncRNA),特别是它们在相变等动态过程中的作用,仍然具有挑战性.
• 现有的mRNA成像技术对于许多ncRNA是不够的.

研究的目的:

• 开发和演示一种可视化活细胞中ncRNAs的有效方法.
• 研究特定ncRNA的动态行为,包括循环RNA (circRNA) 和长非编码RNA (lncRNA).
• 监测ncRNA参与细胞过程,如阶段过渡和应激反应.

主要方法:

• 用一种名为Pepper的光RNA (fRNA) 标签标记示例的ncRNA (circ-HDGFRP3和lncRNA HOTAIRM1).
• 使用超分辨率显微镜,专门结构照明显微镜 (SIM).
• 在细胞应激和病理条件下观察ncRNA动态.

主要成果:

• 使用Pepper fRNA在活细胞中成功可视化和跟踪circRNA和lncRNA.
• 显示的circ-HDGFRP3与p体相互作用,并动态集成到病态FUS聚合物中.
• 在氧化应激期间在压力颗粒中跟踪lncRNAHOTAIRM1,揭示了其在生理和病理状态中的行为.

结论:

• 胡fRNA技术提供了一种有效的工具,用于在体内监测涉及ncRNA的复杂细胞过程.
• 对ncRNA的超分辨率成像使其能够详细研究它们在细胞凝聚物中的定位和动态.
• 这种方法推进了ncRNA功能的研究,特别是在动态事件中,如相位过渡和应激反应.