在光学清除的小鼠骨半截面中深度成像LepR+ stromal细胞
Yuehan Ni1,2, Jiamiao Wu2,3, Fengqi Liu4
1College of Life Sciences, Beijing Normal University, 100875, Beijing, China.
Bone research
|January 12, 2025
概括
本研究介绍了使用组织清除和共聚焦成像进行3D骨组织分析的12天方案. 它能够对骨髓细胞进行详细的可视化,包括表达莱普丁受体的树皮细胞,这对于干细胞利基研究至关重要.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 细胞生物学 细胞生物学
- 人体解剖学 解剖学 解剖学
背景情况:
- 了解骨髓微环境是干细胞生物学的关键.
- 列平素受体表达 (LepR+) 层细胞在骨干细胞利基中起着至关重要的作用.
- 目前的方法限制了骨髓中细胞相互作用的详细3D空间分析.
研究的目的:
- 开发和优化使用组织清除和共聚焦显微镜对骨组织进行3D分析的协议.
- 为了能够在骨半截面内可视化和空间分析造血细胞和肌体细胞,特别是LepR+细胞.
- 为研究骨髓利基中的细胞相互作用提供一种强大且可重复的方法.
主要方法:
- 组织固定,脱和骨组织的冷切割.
- 优化一个12天的协议,以实现光学清除,透明的骨半截面.
- 应用与清除组织相容的多种抗体标记策略.
- 使用专用软件 (Aivia,Imaris) 进行定性和定量图像分析的共聚焦显微镜.
主要成果:
- 成功生成高度透明的骨组织样本,保留3D架构和光信号.
- 在清除的骨半截面内可视化造血细胞和LepR+ stromal细胞.
- 证明协议的可扩展性到其他骨部位,如骨和脊椎.
- 稳定的光信号保留在清除的组织在适当的存储2-3个月.
结论:
- 优化的协议为3D骨组织分析提供了强大,简单和可重复的方法.
- 这种技术显著增强了骨髓内的细胞空间相互作用的研究.
- 该协议是推动干细胞生物学和骨组织恒温的研究的一个有价值的工具.
