通过qRT-PCR进行临床测试的验证和验证的综合方法框架
Carolina Cardona-Ramírez1, Cruz Elena Enríquez-Valencia2, Gina Méndez-Callejas1
1Grupo de Investigaciones Biomédicas y de Genética Humana Aplicada GIBGA, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A, Bogotá, Colombia.
Heliyon
|January 13, 2025
概括
这项研究提出了一种经验证的方法,用于使用逆转录定量聚合酶链反应 (RT-qPCR) 进行定量-定性遗传测试,这对于检测SARS-CoV-2至关重要. 经过验证的方法达到检测的技术限制为5.09副本/反应.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 在遗传检测中,定量-定性查很普遍,但缺乏全面的验证指南.
- 对于涉及样品处理,自动提取和放大技术,需要标准化.
- 精确的遗传物质检测至关重要,特别是在像SARS-CoV-2这样的传染病中.
研究的目的:
- 概述一种用于验证遗传物质检测的定量-定性技术的实用方法.
- 专注于使用逆转录定量聚合酶链反应 (RT-qPCR) 的SARS-CoV-2测试.
- 确保遵守ISO/IEC 17025:2018实验室测试认证标准. 为了确保遵守ISO/IEC 17025:2018实验室测试认证标准.
主要方法:
- 详细介绍了支持RT-qPCR协议的统计方法.
- 开发了验证过程的技术特征概况.
- 为了验证,对黄金标准方法进行了修改.
主要成果:
- 一个技术检测极限 (LOD) 确定在5.09副本/反应.
- 对于LOD,确定了95%的置信区间.
- 验证方法证明了实用性和遵守认证标准.
结论:
- 开发的方法为验证RT-qPCR分析提供了一个实用的方法.
- 这种验证对于可靠的遗传物质检测至关重要,包括SARS-CoV-2.
- 这些发现有助于制定定量-定性分子测试的急需指导方针.


