单个细胞外VEsicle纳米学-通用协议 (SEVEN-UP):可访问的成像平台,用于单个细胞外囊的定量表征

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 纳米技术纳米技术
• 显微镜的使用方法

背景情况:

• 细胞外囊泡 (EVs) 是关键的纳米粒子,参与细胞功能,治疗和生物标志物.
• 由于当前单囊分析方法的局限性,对小型和异质EV的表征具有挑战性.
• 现有的先进的单一EV分析工具往往需要专门的设备,限制了研究人员的可访问性.

研究的目的:

• 通过开发一种可访问和多用途的方法来民主化单细胞外囊 (EV) 的表征.
• 为了使用易于使用的显微镜技术,对EV数量,大小和分子含量进行可靠的评估.
• 验证一种用于在单个EV中分析RNA的新方法.

主要方法:

• 结合的亲和分离,基于单细胞外 VEsicle 纳米镜 (SEVEN) 方法,与超分辨率辐射波动 (SRRF) 显微镜.
• 开发了先进的数据分析算法,包括机器学习,用于EV评估.
• 验证了用于等离子和重组EV的广场和全内部反射光显微镜的SEVEN-Universal协议 (SEVEN-UP).

主要成果:

• 七号通用协议 (SEVEN-UP) 稳定量化了单个电动汽车的数量,大小和内容.
• 在各种显微镜类型上证明了成功的应用,提高了可访问性.
• 在18%来自HEK 293T细胞的EV中鉴定了RNA;这些含RNA的EV比一般的EV人群大得多.

结论:

• 为更广泛的研究界开发了一种经济,多参数,单一的EV表征方法 (SEVEN-UP).
• 结合高级分析的SRRF显微镜为EV研究提供了一个强大的,易于使用的工具.
• 该平台为EV货物的详细分析提供了便利,例如RNA,为EV功能提供了新的见解.