单分子定位显微镜 (SMLM) 在医学脏疾病中可用于人类和动物甲固态嵌 (FFPE) 组织
Scarlet F Brockmoeller1,2, Hayley Slaney3, Alistair Curd3,4
1Pathology & Data Analytics, Leeds Institute of Medical Research at St. James's, School of Medicine, University of Leeds, Leeds, LS9 7TF, UK S.F.Brockmoeller@leeds.ac.uk.
Journal of clinical pathology
|January 13, 2025
概括
一个新的协议使常规单分子定位显微镜 (SMLM) 在甲固定,嵌入脏组织上. 这种先进的成像技术可在48小时内可视化脏疾病 (如最小变化疾病 (MCD) 和焦点细分结核硬化症 (FSGS) 中的亚细胞蛋白分布.
科学领域:
- 脏病理学 脏病理学
- 生物医学成像学 生物医学成像学
- 组织病理学 组织病理学
背景情况:
- 在临床诊断中,固定在甲上,嵌入 (FFPE) 组织是标准的.
- 单分子局部化显微镜 (SMLM) 提供纳米分辨率,但对FFPE样本具有挑战性.
- 为FFPE组织开发强大的SMLM协议对于推进诊断能力至关重要.
研究的目的:
- 建立一个常规的单分子局部化显微镜 (SMLM) 协议,用于成像甲固定,嵌 (FFPE) 医疗脏活检.
- 调查SMLM对脏疾病的临床诊断潜力,包括最小变化疾病 (MCD) 和焦点细分质硬化症 (FSGS).
主要方法:
- 开发和优化SMLM协议,用于正常和患病的脏FFPE组织.
- 确定最佳抗体度,固定剂,固定时间和自光减少步骤 (灭,紫外线漂白).
- 已建立的SMLM获取设置和定量数据分析管道.
主要成果:
- 成功建立了适用于临床脏FFPE样本的常规SMLM协议.
- 在48小时内以10-20nm精度可视化光标记蛋白质.
- 在MCD,FSGS和免疫媒介病中确定了特征性蛋白质分布差异.
结论:
- 建立了临床FFPE脏活检的常规SMLM协议,使亚细胞蛋白质可视化.
- 在病中,SMLM提供了一种快速 (不到48小时) 和精确的方法来分析蛋白质分布.
- 在常规的FFPE组织上,SMLM为组织病理学家提供了亚细胞显微镜的能力,可能补充或超越电子显微镜.
