实验室NIH3T3小鼠胚胎纤维细胞模型没有预测AAV2或AAVdj介导的细胞转化
Luping Qiu1, Steven W Kumpf1, Elias M Oziolor1
1Drug Safety Research & Development, Pfizer, Inc., Groton, CT 06340, USA.
Toxicology and applied pharmacology
|January 14, 2025
概括
再组合腺相关病毒 (rAAV) 基因疗法在体外没有显示细胞转化,这表明细胞转化试验可能无法预测小鼠肝细胞癌风险.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 在瘤学瘤学.
背景情况:
- 重组腺相关病毒 (rAAV) 基因疗法存在插入性突变发生的风险.
- 这种突变已经与rAAV治疗小鼠的肝细胞癌 (HCC) 发展有关.
研究的目的:
- 为了确定体外细胞转化试验 (CTA) 是否可以检测AAV2或AAVdj介导的细胞转化.
- 评估体外测试对体内rAAV诱导的HCC的预测价值.
主要方法:
- 利用NIH3T3小鼠细胞系进行体外细胞转化试验.
- 采用CRISPR-Cas9在Rian位点创建双链断裂,增强AAV DNA的整合.
- 测试了针对Rian位点的rAAV载体和之前识别的HCC诱导载体.
主要成果:
- 在AAV转换的NIH3T3细胞和未经处理的对照细胞之间没有观察到转化频率的显著差异.
- 在体外细胞转化试验中没有检测到NIH3T3细胞中AAV介导的细胞转化.
结论:
- 实验室细胞转化试验可能无法预测小鼠的rAAV诱导的肝细胞癌.
- 该研究表明,无论是转化率低于自发水平,还是体外分析缺乏对rAAV基因治疗风险的预测能力.


