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Updated: Jun 2, 2025
06:33
Production of Human CRISPR-Engineered CAR-T Cells
Published on: March 15, 2021
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通过非病毒转染系统制造的多次编辑的CAR-T细胞的功能性强度增加
Aine O'Sullivan1, Sarah Case1, Aisling McCrudden1
1Avectas, Cherrywood Business Park, Dublin, Ireland.
Molecular therapy. Methods & clinical development
|January 15, 2025
概括
一个非病毒转染系统Solupore有效地制造了多次编辑的CAR-T细胞用于癌症治疗. 与电穿孔相比,这种方法保持了细胞健康,并增强了抗瘤活性.
科学领域:
- 细胞免疫疗法细胞免疫疗法
- 基因编辑技术 基因编辑技术
- 癌症治疗方法 癌症治疗方法
背景情况:
- 化学抗原受体 (CAR) -T细胞疗法在血液恶性瘤中显示出前景.
- 下一代CAR-T细胞需要基因修饰来治疗固体瘤和某些血液癌症.
- 制造过程必须保持T细胞的健康和功能,以便有效的基因编辑.
研究的目的:
- 评估Solupore,一种非病毒物理化学转染系统,用于制造多次编辑的CAR-T细胞.
- 在细胞健康,功能和抗瘤功效方面,将Solupore与电穿孔进行比较.
- 评估基于Solupore的制造对冷保存后CAR-T细胞性能的影响.
主要方法:
- 利用CRISPR-Cas9核糖蛋白来通过Solupore对T细胞进行多基因编辑.
- 将Solupore介导的三重编辑与传统的电穿孔进行比较.
- 评估了T细胞亡,干细胞记忆群和氧化酸化.
- 进行了用于CD19 CAR表达和冷保存的lentiviral转导.
- 评估了NSG小鼠的免疫突触强度,对CD19+拉吉细胞的细胞毒性,以及体内瘤生长抑制.
主要成果:
- 与电穿孔相比,Solupore制造导致了减少亡,并保持了与电穿孔相比更高的氧化酸化的干细胞记忆T细胞.
- 使用Solupore制造的三重编辑的CAR-T细胞在冷保存后表现出增强的免疫突触强度和细胞细胞毒性.
- 在体内研究表明,与电孔细胞相比,Solupore制造的CAR-T细胞实现了超过30倍的瘤生长抑制.
结论:
- 索卢波尔是一个可行的,与良好制造实践一致的平台,用于生产功能性,多次编辑的CAR-T细胞.
- 这种非病毒方法在保持T细胞质量和提高治疗效率方面比电穿孔具有优势.
- 基于Solupore的制造具有很大的潜力,可以推进用于挑战性癌症的CAR-T细胞疗法.
