快速视觉检测E型肝炎病毒,结合逆转录复合酶辅助放大与侧向流量测量棒和实时光
Bingyan Wei1, Wenlong Wang2, Zixuan Guo1
1Laboratory of Animal Pathology and Public Health, National Key Laboratory of Veterinary Public Health and Safety, College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing, China.
Journal of clinical microbiology
|January 16, 2025
概括
开发了两种新的快速诊断方法,即逆转录重组酶辅助放大与侧向流量测量棒 (RT-RAA-LFD) 和定量实时RT-RAA (qRT-RAA),用于检测猪肝炎E病毒 (HEV). 这些测试在兽医环境中提供了准确和有效的HEV查.
科学领域:
- 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断
- 分子生物学分子生物学
- 动物传播疾病 动物传播疾病
背景情况:
- 肝炎E病毒 (HEV) 是一种全球性动物传染病原体,主要通过受污染的食物来源传播,如未熟的猪肉.
- 猪是动物性HEV菌株的主要储存库,造成严重的公共卫生问题.
- 准确和快速检测猪中的HEV对于疾病控制和预防至关重要.
研究的目的:
- 开发和评估两种新,快速和方便的方法来检测猪样本中的HEV RNA.
- 与现有方法相比,评估开发的测定方法的灵敏度,特异性和诊断准确性.
- 建立有效的工具,在兽医环境中广泛有效地查猪HEV.
主要方法:
- 开发和优化反转录重组酶辅助放大与侧向流量测量棒 (RT-RAA-LFD) 试验.
- 开发和优化定量实时逆转录复合酶辅助放大 (qRT-RAA) 试验.
- 使用猪胆汁和便样本评估测试性能,将结果与定量逆转录PCR进行比较.
主要成果:
- 在RT-RAA-LFD试验中,在39°C的温度下,在15分钟内检测到HEVRNA,检测极限 (LOD) 为247副本/μL.
- 在42°C的20分钟内,qRT-RAA试验实现了更高的灵敏度,LOD为25副本/μL.
- 这两种测定都显示出高特异性,没有与其他猪病原体的交叉反应性,并且与实地样本中的定量RT-PCR有很好的一致性 (相应的匹配率分别为97.14%和98.78%).
结论:
- 开发的RT-RAA-LFD和qRT-RAA测定是用于在猪中检测HEV RNA的快速,敏感和特定的诊断工具.
- 这些测试具有很大的潜力,可以在兽医诊所和现场环境中广泛和有效地查猪HEV.
- 这些发现有助于改善HEV的监测和控制策略,减轻其动物性传染风险.
