在新生儿C57Bl/6小鼠中循环中性粒细胞枯竭的协议
Devashis Mukherjee1,2, Sriram Satyavolu3, Sarah Cioffi1
1Department of Pediatrics, Case Western Reserve University School of Medicine, 11100 Euclid Ave, Cleveland, OH 44106, United States.
Journal of leukocyte biology
|January 17, 2025
概括
在小鼠中开发有效的新生儿中性粒细胞枯竭是具有挑战性的. 使用抗Ly6G和抗鼠 κ Ig轻链抗体的P3双协议显著改善了新生小鼠中性粒细胞清除.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 新生儿研究新生儿研究
- 动物模型 动物模型
背景情况:
- 在小鼠中的新生儿中性粒细胞枯竭策略往往无法实现深度清除和准确的残留检测.
- 现有的方法难以完全消除和可靠地测量剩余的中性粒细胞.
研究的目的:
- 适应和评估一种异型切换方法,用于新生小鼠中性粒细胞的深度枯竭.
- 在新生小鼠中比较四种不同中性粒细胞减少方案的疗效.
主要方法:
- 测试了四种协议:P3 Ly6G,P1-3 Ly6G,P3 Dual和P1-3 Dual,涉及抗Ly6G和/或抗老鼠 κ Ig轻链抗体.
- 在外周循环,骨髓和脏中评估了中性粒细胞枯竭,使用流细胞计来检测细胞内和细胞外Ly6G.
- 用同型控制抗体进行比较.
主要成果:
- P1-3双协议在外周循环中实现了97%的中性粒细胞耗尽,显著超过P1-3 Ly6G (74%) 和P3 Ly6G (50%) 协议.
- 在P3双协议实现93%的耗尽,优于Ly6G单独的协议.
- 单独的Ly6G协议未能消除细胞内Ly6G,该Ly6G在CD45+细胞中仍然可检测.
结论:
- 双P3协议是一种高效和潜在的更道德的方法,用于在新生小鼠中深层次的中性粒细胞耗尽.
- 该协议提供了每日抗Ly6G注射的替代方案,解决了当前方法的局限性.
