基于光的快速选方法用于SARS-CoV-2抑制剂的发现

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 药物发现 药物发现 药物发现
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 随着COVID-19的爆发,人们越来越需要有效的抗病毒药物查. 传统的方法是缓慢和劳动密集型的,特别是对于像SARS-CoV-2这样的高封闭病原体.
• 现有的抗病毒检测试验通常需要长时间的潜伏期和多个手动步骤,限制吞吐量和速度.

研究的目的:

• 为SARS-CoV-2 (严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2) 设计和验证一个半自动化药物查平台.
• 开发一种使用纳米-化酶记者病毒的快速测试方法,该病毒绕过病毒无活化和染色步骤,使得查速度更快.
• 适应满足NIH标准的高通量查 (HTS) 平台.

主要方法:

• 使用了一种表达ACE2和TMPRSS2受体的稳定A549细胞系和一个重组的SARS-CoV-2纳米-化酶记者病毒.
• 采用多个液体处理器进行半自动化处理,采用96孔和384孔板格式.
• 在感染后24小时评估发光信号作为病毒复制的替代品,绕过传统的48小时测试.

主要成果:

• 感染后24小时的发光量测试证明是稳健可靠的,与既有方法相关.
• 在96和384井板的验证中,证明了可重复的结果,Z因子≥0.5和变化系数<20%.
• 对240种化合物的查发现了48种潜在的命中药物,确认了3种新的强效和无毒的抗病毒化合物.

结论:

• 开发的半自动化平台使得对SARS-CoV-2的快速和可靠的药物查成为可能.
• 该平台的效率和适应性使其适合加速新型抗病毒疗法的发现.
• 这种方法可以很容易地适应对其他纳米-化酶记者病毒的查.