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Updated: Jun 13, 2026

The MultiBac Protein Complex Production Platform at the EMBL
Published on: July 11, 2013
使用IC-BEVS和多阶段生物反应器持续生产流感VLP
Ricardo Correia1,2, Taja Zotler3, Francisco Ferraz1,2
1Instituto de Biologia Experimental e Tecnológica (iBET), Oeiras, Portugal.
使用昆虫细胞-细菌病毒表达载体系统 (IC-BEVS) 实现了流感血凝素显示病毒样颗粒 (HA-VLPs) 的持续产生. 这种加剧的过程使HA-VLP标位在20天内保持一致,克服了以前的限制.
科学领域:
- 生物技术和生物加工
- 分子病毒学分子病毒学
- 细胞培养工程 细胞培养工程
背景情况:
- 昆虫细胞-细菌病毒表达载体系统 (IC-BEVS) 是一个成熟的生物生产平台.
- 过程强化,包括连续制造,是生物技术的一个关键趋势.
- 以往IC-BEVS的连续生产工作受到细胞溶解和病毒传递效应的限制.
研究的目的:
- 开发和实施一种使用IC-BEVS.进行流感血质素显示病毒样颗粒 (HA-VLP) 的强化,连续生产过程.
- 为了评估不同的昆虫细胞系和重组型baculovirus构造,以获得最佳的连续HA-VLP生产.
- 评估生物反应器停留时间对HA-VLP产量和质量的影响.
主要方法:
- 设计了一个多阶段生物反应器系统,包括一个细胞生长生物反应器,为三个并行生产生物反应器提供能量.
- 生产生物反应器在不同的居住时间 (18,36,54小时) 运行,并持续收获.
- 测试了两种昆虫细胞系 (High Five,Sf9) 和两种重组型细菌病毒结构 (rBACbacmid,rBACflashbac).
主要成果:
- 在20天的连续运行中,rBACflashbac与Sf9细胞的组合产生了一致的HA-VLP标位 (34 ± 14 HA标位/毫升) 和baculovirus标位 (10-8-10-9 pfu/毫升).
- 较长的停留时间与增加的HA-VLP表达相关,最大标位为54小时.
- 传输电子显微镜证实了HA-VLP在连续生产期间的存在.
结论:
- 使用IC-BEVS成功实施了HA-VLP的连续生产过程,证明了工艺的强化.
- 开发的系统克服了与IC-BEVS的性和病毒传递效应相关的局限性.
- 这项工作为使用IC-BEVS的集成,连续生物制造平台奠定了基础.
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