选择和特征化DNA适应器识别高流动性组盒1蛋白 (HMGB1) 并增强其抗炎活性

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 高流动性组盒1 (HMGB1) 与各种疾病有关,包括炎症,自身免疫性疾病和癌症.
• 准确量化生物流体中的HMGB1对于临床应用至关重要.

研究的目的:

• 为了分离和描述高亲和度单链DNA (ssDNA) 向HMGB1.1的受体.
• 评估这些阿普坦体作为诊断探针和HMGB1活动的功能调节器的实用性.

主要方法:

• 通过指数式丰富对联体的系统进化 (SELEX) 用于选择ssDNA的阿巴坦对HMGB1.
• 使用西南斑点,酶相关的吸剂测定 (ELASA) 和体化学,评估了aptamer亲和力和特异性.
• 在THP-1细胞中研究了体对HMGB1诱导的细胞反应的影响.

主要成果:

• 鉴定出了一种高亲和度ssDNA合体,H-ap25,其解离常数为8.20 ± 0.53nmol/L,准HMGB1 B盒.
• H-ap25通过西南斑块,ELASA和组织化学证明了有效的HMGB1检测.
• 在THP-1细胞中,H-ap25显著增强了HMGB1诱导的促炎细胞因子 (TNF-α,IL-1β,IL-6),TLR9和NF-κB激活的表达.

结论:

• 在各种测定中,ssDNA 合体 H-ap25 作为 HMGB1 检测的宝贵工具.
• H-ap25还可以作为HMGB1的增强剂,调节其在细胞环境中的生物活性.
• 这些发现凸显了aptamers在HMGB1.1的诊断和功能研究中的双重潜力.