高通量查以确定内分泌干扰物:低分辨率并列MS和高分辨率MS的贡献
Thibaut Léger1, Rémy Le Guével2, Hélène Solhi2
1Univ Rennes, Inserm, EHESP, Irset (Institut de recherche en santé, environnement et travail) - UMR_S 1085, F-35000, Rennes, France; Toxicology of Contaminants Unit, Fougères Laboratory, French Agency for Food, Environmental and Occupational Health & Safety (ANSES), 35306 Fougères CEDEX, France.
Analytica chimica acta
|January 20, 2025
概括
使用质谱学的新分析工作流量量化了生物样本中的13种类固醇. 该方法通过检测代谢途径中断,有效地识别内分泌干扰物 (EDs),支持化学风险评估.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 毒理学 毒理学 毒理学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 环境的化学多样性需要高通量体外测试来进行风险评估.
- 取代,减少,改进 (3R) 战略指导新毒理学测试方法的开发.
- 评估化学效应,单独或作为混合物,需要强大的分析工具.
研究的目的:
- 开发和验证用于量化类固醇的高通量分析工作流.
- 使用NCI-H295R细胞测定来选内分泌干扰物 (EDs).
- 为了识别ED暴露引起的代谢途径干扰.
主要方法:
- 开发了一种工作流程,将低分辨率双重质谱 (MS/MS) 和高分辨率质谱 (HRMS) 结合起来.
- 在细胞培养基,血和血清中量化13种类固醇.
- 验证涉及将NCI-H295R细胞暴露在已知的EDs (双A,普罗克洛拉兹,可纳,阿特拉,福斯科林) 和分析介质中.
主要成果:
- 工作流准确量化了13种类固醇,符合经合组织对三重四极MS/MS的建议.
- 高分辨率质谱仪 (HRMS) 提供了与MRM和ELISA相似的敏感和可重复的结果.
- 基于HRMS的生物信息学在ED暴露后检测到类固醇生成,脂肪酸, purin 和氨基酸代谢中出现的干扰.
结论:
- 建立了一个强大的MS1-HRMS工作流程,用于绝对类固醇量化和细胞测试中的ED查.
- 该方法利用小样本量 (200μL),高通量固相提取和自动注释以提高效率.
- 这种工作流程通过揭示类固醇生成和其他关键代谢途径的干扰来有效地识别ED.
