在CHO细胞中灵活的混合特定位点集成式表达系统,用于单克隆抗体表达卡塞特的高通量评估

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中的特定位点整合 (SSI) 对于稳定的单克隆抗体 (mAb) 生产至关重要.
• 优化基因组整合,克隆背景和表达式磁带是最大化生产力的关键.
• 现有的SSI方法往往缺乏系统参数比较的吞吐量.

研究的目的:

• 开发一种高吞吐量,化学选择的SSI系统,用于快速细胞系的发展.
• 在mAb表达卡塞特中比较新型遗传调节元素的疗效.
• 为工业 mAb 生产优化 RMCE 衍生细胞线.

主要方法:

• 开发了一种能够进行重组酶介导的磁带交换 (RMCE) 的SSI系统,利用化学选择进行缩.
• 在不同方向上比较了8个mAb表达盒带有新元素 (Azin1 CpG岛,Piggybac 5'终端重复).
• 在两个治疗mAbs. 的两个基因组位点评估了磁带的性能.

主要成果:

• 在不到一个月的时间里,RMCE-SSI系统丰富了转基因表达池.
• 在不同的基因组站点和mAbs.中观察到一致的生产力和mRNA表达模式.
• 最优的表达卡塞特提高了mAb的生产力7到11倍.

结论:

• 开发的RMCE-SSI系统有助于对表达卡塞特进行高通量比较.
• 该系统可从一致的遗传背景优化细胞系,用于工业 mAb 生产.
• 新型遗传元素显著提高了CHO细胞中的mAb生产力.