开发和验证一种UHPLC-MS/MS方法,用于对人体血中跨ISRIB进行定量分析

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 生物化学 生物化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 综合应激反应 (ISR) 是一种细胞机制,在压力下抑制蛋白质合成.
• 跨集成应激反应抑制剂 (trans-ISRIB) 可以逆转ISR激活,并显示出治疗神经退行性疾病的潜力.
• 在生物矩阵中对跨ISRIB的可靠量化对于其临床前和临床评估至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证一种敏感和特定的UHPLC-MS/MS方法,用于对人体血中的跨ISRIB进行定量分析.
• 为了满足美国FDA生物分析方法验证指南.

主要方法:

• 从人体血中提取跨ISRIB和内部标准的液液提取.
• 使用UHPLC在Waters XSelect HSS T3柱上进行分离,其移动相为70%甲醇中的0.1%酸.
• 在多重反应监测 (MRM) 模式下,通过正电子喷雾电离式双重质谱法 (ESI+-MS/MS) 检测和量化.

主要成果:

• 该方法证明了跨ISRIB的广泛线性校准范围,从0.500到1000nM.
• 实现了高特异性,精度,准确性和回收.
• 该方法适用于在人体血样本中量化trans-ISRIB.

结论:

• 已经成功开发了一种可靠且经过验证的UHPLC-MS/MS方法,用于在人体血中量化跨ISRIB.
• 这种分析方法解决了支持跨ISRIB治疗神经退行性疾病的治疗发展的关键需求.