一个基于核囊单克隆抗体的三明治ELISA用于PRRSV-2和PRRSV-1的一般检测
Shaohua Sun1, Kaili Zhang1, Jiajia Zhang1
1College Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China; Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China; Comparative Medicine Research Institute, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China; Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China.
使用单克隆抗体的新型三明治ELISA可以检测所有猪生殖和呼吸系统综合征病毒 (PRRSV) 菌株. 这种诊断工具提供了一种简单,快速和有效的PRRSV检测方法.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 诊断试验开发 诊断试验开发
背景情况:
- 猪生殖和呼吸系统综合征病毒 (PRRSV) 在猪生产中造成全球经济重大损失.
- 由于PRRSV的遗传多样性,因此需要广泛的检测方法来检测PRRSV-2和PRRSV-1菌株.
研究的目的:
- 开发一种通用诊断试验,用于检测所有PRRSV-2血统和PRRSV-1亚型.
- 在PRRSV核体 (N) 蛋白上识别保存的B细胞表位,用于抗体开发.
主要方法:
- 针对PRRSV N蛋白质的四种单克隆抗体 (mAbs) 的生成和表征.
- 精确的B细胞表位的识别 (KPHF55和HHTVR113) 和保存表位的选择,用于测试开发.
- 开发和验证使用精选的mAbs (6D7,4D12) 针对保存的KPHF55表位的三明治ELISA.
主要成果:
- 鉴定出KPHF55表位在所有PRRSV-2和PRRSV-1菌株中高度保存.
- 开发的三明治ELISA显示出高的特异性,灵敏性和可重复性.
- 该试验在检测133个临床样本时,与实时RT-PCR达到了84.21%的一致性.
结论:
- 基于mAb的三明治ELISA适用于检测各种PRRSV菌株.
- 这种试验提供了一种简单,快速和高内容的方法来诊断PRRS.
- 开发的诊断工具有助于管理猪群中PRRSV感染.
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