相关实验视频
Updated: May 31, 2025
10:02
piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells
Published on: November 5, 2012
17.2K
在CHO细胞中高效地产生复合人类FVII,使用piggyBac转位子系统
Zhen Yang1, Xueyun Wang2, Shan Luo2
1Key Laboratory of Quantitative Synthetic Biology, Shenzhen Institute of Synthetic Biology, Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinese Academy of Sciences, Shenzhen 518055, PR China; Shenzhen Weiguang Biological Products Co., Ltd., Shenzhen, 518107, PR China; Shenzhen Innovation Pharmaceutical Engineering Laboratory for Recombinant Plasma Proteins, Shenzhen, 518107, PR China.
Protein expression and purification
|January 23, 2025
概括
这项研究表明,使用piggyBac转位子系统在CHO细胞中有效地产生复合因子VII (rhFVII),从而达到对血友病治疗的高表达水平.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物化学 生物化学
- 血液学 血液学 血液学
背景情况:
- 活性凝血因子VII (FVIIa) 对于用抑制剂治疗血友病患者至关重要.
- 重组人体因子VII (rhFVII) 是一个关键的FVIIa来源,但细胞系中的表达通常很低.
- 现有治疗方法面临的挑战是针对FVIII和FIX的抗体开发.
研究的目的:
- 开发一种生产复合人体因子VII (rhFVII) 的高效方法.
- 为了优化中国汉姆斯特卵巢 (CHO) 细胞系的rhFVII表达水平.
- 为了验证piggyBac转位子系统在生物制药生产中的实用性.
主要方法:
- 利用piggyBac (PB) 转位子系统在CHO细胞中进行外源基因表达.
- 用于rhFVII生产的料批细胞培养技术.
- 使用SDS-PAGE和Western Blot.分析了rhFVII表达和纯度.
- 通过染色活性ELISA套件评估凝血活性.
主要成果:
- 在CHO细胞系中实现了高效的rhFVII生产.
- 在料批培养中,在高达100mg/L的水平上表达了rhFVII.
- 证实了分泌的rhFVII的身份,纯度和功能凝固活性.
结论:
- 通过PiggyBac的转位子系统,可以高效地生产复合FVII.
- 该系统为高产量的生物制药制造提供了一个有前途的战略.
- 优化的rhFVII生产可以改善血友病的治疗选择.
