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Updated: Jun 20, 2026
10:41
Identifying Amino Acid Overproducers Using Rare-Codon-Rich Markers
Published on: June 24, 2019
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在乳酸细菌中的P23构成性促进物的突变库的构建和表征
Linbing Yu1, Xin Song1, Guangqiang Wang1
1Shanghai Engineering Research Center of Food Microbiology, School of Health Science and Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China.
Journal of biotechnology
|January 23, 2025
概括
研究人员为乳酸细菌 (LAB) 设计了一个247个构成性促进子突变 (P23) 的库. 这些新型促进剂增强基因表达,为LAB中的代谢工程和合成生物学提供了有价值的工具.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 合成生物学 合成生物学
- 微生物工程 微生物工程
背景情况:
- 乳酸细菌 (LAB) 需要多样化,有特征的构成性促进体来控制基因表达.
- 现有的LAB促进者图书馆缺乏足够的多样性和定量数据.
- 在LAB中强大的构成性促进物P23被选择用于突变发生.
研究的目的:
- 为LAB生成和描述一个P23促进子突变体库.
- 评估这些新型促进剂在增强基因表达中的实用性.
- 为LAB提供代谢工程和合成生物学工具.
主要方法:
- 使用易发生错误的PCR和dNTP模拟诱导的突变生成了247个P23促进子突变.
- 在Streptococcus thermophilus中选突变库,使用红色光蛋白 (RFP) 光.
- 在 Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis 和 Escherichia coli 中验证的促进剂活性趋势.
主要成果:
- 突变P23的活性是野生类型P23.3的0.01至3.63倍.
- 促进剂强度趋势在LAB物种中保持不变,但在大肠杆菌中不同.
- 选择的突变物显著增强了S. thermophilus中的酶活性 (SOD,GusA,β-gal),其中一些突变物高达野生类型P23的1.82倍.
结论:
- 成功创建了一个新的P23构成性促进子突变体库,具有多种强度.
- 证明了这些突变的应用潜力,用于增强LAB中的酶表达.
- 在LAB建立了先进代谢工程和合成生物学的基础.
