一种具有Microcin B17的双表达等离子体,与 prokaryotic 和哺乳动物系统兼容

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 蛋白质等离子体成系统,如控制细胞死亡 (Ccd),对于高效的等离子体DNA重组至关重要.
• 一个常见的选择是CcdB毒素,长度长 (309 bp),推动了对更短的毒素的搜索.

研究的目的:

• 为了评估微信B17 (MccB17),一个43氨基酸,在pgMAX-II双表达等离子体中进行DNA重组.
• 评估MccB17在促进 prokaryotic 和哺乳动物系统中的基因克隆和双重表达方面的效率.

主要方法:

• 使用了pgMAX-II双表达等离子体系统.
• 纳入了来自lacZ的α-基因,用于α-补充.
• 测试了MccB17在促进大肠杆菌和哺乳动物细胞中的DNA重组和基因表达 (DsRed) 的有效性.

主要成果:

• 通过α-补充,pgMAX-II/MccB17等离子体证明了对外部DNA的高效克隆.
• 在大肠杆菌和哺乳动物细胞中成功表达了DsRed光蛋白基因.
• MccB17显示了与CcdB.B.相比的DNA重组潜力.

结论:

• 新的pgMAX-II/MccB17等离子体使外部基因的高效和简单的亚克隆成为可能.
• 该系统支持 prokaryotic (*E. coli*) 和哺乳动物细胞的双重表达,表明其广泛适用性.
• MccB17在多功能双表达载体中为等离子体成系统提供了一个可行的,更短的替代方案.