一种免疫细胞化学方法来研究翻译活跃的HIV储存库

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 联合抗逆转录病毒疗法 (cART) 抑制HIV复制,但不能消除病毒.
• 艾滋病毒在长期存储中持续存在,导致在cART停止后病毒反弹.
• 活跃的HIV储存细胞有助于艾滋病毒感染者 (PLWH) 慢性免疫激活.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的自动化免疫细胞化学 (ICC) 试验,用于检测和量化细胞内HIV囊蛋白 (CA).
• 建立一种测量转化活性HIV储存量的方法.

主要方法:

• 开发了一种使用抗CA抗体和计算图像分析的自动化免疫细胞化学试验 (CA-ICC).
• 通过使用细胞系和原始细胞对数字ELISA,qPCR和流细胞计进行验证的CA-ICC.
• 通过使用HIV阴性和感染细胞来限制稀释和特异性来评估CA-ICC敏感性.
• 从动物模型和临床标本中应用CA-ICC检测PBMC中的HIV CA和SIV p27.

主要成果:

• CA-ICC表现出高的特异性和敏感性,检测到每百万个CA-阳性细胞中只有10个CA-阳性细胞.
• 试验的灵敏度超过了流细胞计的灵敏度.
• 动物模型中的量化细胞内CA与血病毒载荷和细胞相关的CA相关.
• 在临床样本中成功应用CA-ICC来评估治疗干预措施.

结论:

• CA-ICC是一种简单,特定和敏感的成像方法,用于检测散装制剂中的CA阳性细胞.
• 这种测试为量化活跃的HIV储存提供了有价值的工具.
• 在临床前研究和评估HIV治疗策略中,CA-ICC具有潜在的应用.