高活力循环瘤细胞从单细胞水平上从全血中进行排序,使用激光诱导的前向转移辅助微过

科学领域:

• 生物医学工程 生物医学工程
• 细胞生物学 细胞生物学
• 在瘤学瘤学.

背景情况:

• 对循环瘤细胞 (CTC) 的有效隔离对于癌症转移研究和个性化医学至关重要.
• 细胞活力对于下游分子分析,如RNA测序,至关重要.
• 现有方法在单细胞分辨率下实现高可行性CTC隔离方面面临挑战.

研究的目的:

• 开发和验证一种用于全血中高活性的CTC丰富和检索的新系统.
• 为了在孤立的单个CTC上进行下游分子分析,包括RNA测序.
• 提高临床应用中CTC隔离的效率和吞吐量.

主要方法:

• 开发一个激光诱导的前向转移辅助微过系统 (LIFT-AMFS).
• 使用LIFT兼容的双级微过器 (DSMF) 进行基于大小的细胞分离和液体封装.
• 优化了DSMF设计,以提高捕获效率和单细胞检索.

主要成果:

• 达到88%的CTC捕获效率,吞吐量为15.0毫升/分钟.
• 在提取阶段获得超过95%的单细胞产量,具有高细胞活力.
• 孤立的CTC产生了足够的cDNA (>4.5 ng) 来构建图书馆,单细胞测序的Q30得分>95.92%.

结论:

• 该LIFT-AMFS有效地从全血中丰富和检索高活性的CTC.
• 该系统支持下游分子分析,包括ex vivo培养和RNA测序.
• LIFT-AMFS证明了在瘤学中推进细胞和生物医学研究的巨大潜力.