薄层染色学超小测试单一原发性白血病细胞中的雄素激酶激活

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 癌症生物学 癌症生物学

背景情况:

• 脂质信号的细胞间异质性影响癌症的反应和复发.
• 白血病表现出脂质信号通路的变化.
• 了解这些变异对于有针对性的疗法至关重要.

研究的目的:

• 开发一个高通量,单细胞平台用于脂质信号分析.
• 为了研究白血病细胞中的斯芬戈氨酸激酶活性及其代谢物.
• 在急性髓性白血病中表征瘤间和瘤内异质性.

主要方法:

• 开发一个小型的,平行薄层染色学平台,用于单细胞脂质检测.
• 用斯芬哥辛5 (Sph-Cy5) 装载细胞并分离其代谢物 (Sph-1-酸-Cy5,六甲酸Cy5).
• 测试了来自急性髓性白血病患者的1200多个单细胞,有和没有松素激酶抑制剂.

主要成果:

• 该平台实现了极好的重复性,可重复性和超小脂质体积的低检测极限.
• 与CD34-细胞相比,CD34+白血病爆细胞显示Sph-Cy5转化为S1P-Cy5的转化显著更高.
• 抑制的CD34+细胞仍然表现出更大的S1P-Cy5形成,表明持续的酶活性.
• 检测结果显示,患者样本中氨酸激酶活性具有显著的瘤内部和瘤内部异质性.

结论:

• 开发的平台可实现快速,高通量单细胞脂质分析.
• 在CD34+和CD34-白血病细胞之间存在明显的基酶活性差异.
• 来自患者的急性髓性白血病细胞在脂质代谢中表现出相当大的异质性,影响治疗策略.