在血中检测NAD⁺的生物分析方法,使用溶液相Candida boidinii形式脱酶和电化学检测

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 生物传感器是一种生物传感器.

背景情况:

• 尼古丁胺胺氨基二核酸 (NAD+) 对于细胞代谢至关重要,并与许多疾病有关.
• 准确量化NAD+对于了解代谢障碍和疾病进展至关重要.

研究的目的:

• 开发一种快速而敏感的电化学生物分析方法,用于在人血中检测NAD+.
• 为了利用溶液阶段的Candida boidinii形成脱酶 (CbFDH) 来量化NAD+.

主要方法:

• 在甲酸盐的存在下,利用CbFDH催化NAD+转化为NADH.
• 通过使用一次性碳丝印制电极进行电化学测量量产生的NADH的量化.
• 评估测定性能,包括线性,灵敏度,检测极限和针对常见等离子体干扰物的选择性.

主要成果:

• 电化学试验显示了从3.74μM到2.00μM的线性反应,灵敏度为8.98 ± 0.18μA mM-1.1.
• 实现了低检测极限 (1.12μM),受常见血成分的最小干扰 (<5%).
• 高恢复率 (98.0-104.4%) 和对色度测试的验证证实了该方法的准确性.

结论:

• 开发的电化学方法为人类血中NAD+量化提供了一个快速 (1分钟),灵敏和选择性的平台.
• 这种生物分析方法对临床诊断和研究NAD+相关疾病具有前景.
• 使用CbFDH和印电极为NAD+生物标志物分析提供了具有成本效益和可访问性的工具.