优化内部序列与CMV促进体相结合,可以增加CHO细胞中的重组蛋白表达
Ting-Ting Xu1,2, Yan-Fang Wang3, Jing-Jia Yuan1
1International Joint Research Laboratory for Recombinant Pharmaceutical Protein Expression System of Henan, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China.
Scientific reports
|January 29, 2025
概括
优化用细胞巨乳病毒 (CMV) 促进体的内子序列显著提高了中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中的重组蛋白质产量. 这种增强对于生物制药生产和开发高生产率的CHO细胞系至关重要.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞对于生物制药生产至关重要.
- 改善复合治疗蛋白 (RTP) 产量对于生物制药行业至关重要.
- 细胞巨乳病毒 (CMV) 促进体通常用于CHO细胞中的RTP表达.
研究的目的:
- 评估各种合成内子与CMV促进体结合对CHO细胞RTP表达的影响.
- 研究增强稳定转基因表达和蛋白质产量的方法.
- 为了确定基础上改善蛋白质生产的分子机制.
主要方法:
- 人类CMV内的切断和合成内的评估 (首先ctEF-1α,首先EF-1α,仿真,β-globin).
- 内子与CMV促进体的组合,用于短暂和稳定的重组CHO细胞的表达.
- 定量PCR (qPCR) 用于mRNA水平分析和转录组学用于基因表达造型.
主要成果:
- 截断,EF-1α第一个,嵌合体和β-环球因特龙显著改善了稳定的转基因表达.
- 优化的内子序列与CMV促进体相结合,增加了转基因mRNA水平.
- 转录学揭示了mRNA处理,核出口,翻译和细胞周期调节中的差异性基因表达.
结论:
- 与CMV促进体一起优化内序列可以提高CHO细胞中的重组蛋白产量.
- 这一战略对于开发用于工业应用的高生产率CHO电池生产线具有价值.
- 了解基因表达变化为改善蛋白质生产的机制提供了洞察力.
