双重有效载荷mRNA / LNP货物的高通量定量和特征通过调整尺寸排除和离子配对逆相检测

科学领域:

• 生物制药学分析分析
• 核酸治疗药物 核酸治疗药物
• 分析化学是一种分析化学.

背景情况:

• 脂质纳米粒子 (LNP) 技术对于基于mRNA的疗法和疫苗至关重要.
• 在LNP中分析多个核酸有效载荷存在重大分析挑战.
• 现有的方法通常仅限于单个有效载荷分析,并且缺乏复杂混合物的解决方案.

研究的目的:

• 评估离子配对逆相 (IP-RP) 和大小排除色谱 (SEC) 用于分析配方LNP中的核酸有效载荷.
• 开发和验证基于LC的可靠方法,用于量化和描述LNP中的多个核酸成分.
• 解决LNP药物产品中多有效载荷核酸混合物所带来的分析挑战.

主要方法:

• 使用洗剂释放有效载荷的LNP中断.
• 使用快速梯度的IP-RP染色学分离和分析有效载荷.
• 在线SEC分析mRNA/LNP使用含有酒精和洗剂的移动相进行通用去配方.
• 开发一个高通量5分钟SEC分离方法.

主要成果:

• 使用IP-RP和SEC方法实现了有效载荷的可重复量化.
• 脂质和表面活性剂的高效化是通过在IP-RP中高有机溶剂洗来实现的.
• 美国证券交易委员会 (SEC) 展示了一种5分钟高通量平台方法,适用于普遍的LNP去配方.
• 这两种方法都能够进行多属性分析,包括定量和杂质表征 (例如,通过IP-RP进行mRNA-脂质添加物,通过SEC进行尺寸变异).

结论:

• 已建立的基于LC的测定 (IP-RP和SEC) 为分析LNP中的多有效载荷核酸混合物提供了可靠的解决方案.
• 这些方法有助于精确的有效载荷量化和杂质分析,这对于基因疗法的质量控制至关重要.
• 开发的试验很容易被采用,并增强了新兴的LNP基因疗法的分析能力.