益生菌Escherichia coli的精密工程Nissle 1917与主要编辑
Pei-Ru Chen1, Ying Wei1, Xin Li1
1School of Environmental Science and Engineering, Shandong University, Qingdao, China.
Applied and environmental microbiology
|January 31, 2025
概括
我们开发了一种多功能原始编辑系统,用于设计像大肠杆菌Nissle 1917这样的益生菌. 这种CRISPR-Cas工具能够精确地编辑DNA用于诊断和治疗,减少了目标外突变.
科学领域:
- 合成生物学 合成生物学
- 微生物工程 微生物工程
- 基因编辑技术的技术
背景情况:
- 克里斯普尔-卡斯系统正在彻底改变精密医学,特别是用于诊断和治疗的工程益生菌.
- 开发多功能益生菌细菌需要精确的基因工程来引入新的功能,同时尽量减少意外的基因组变化.
研究的目的:
- 介绍一个精简的原始编辑系统,用于精确的基因工程益生菌 * Escherichia coli * Nissle 1917.
- 建立一个多功能平台,用于创建具有增强功能和最小的目标外影响的工程益生菌.
主要方法:
- 利用了必不可少的遗传模块:Cas9尼克酶,编码子优化逆转录酶和主要编辑指导RNA.
- 优化工作流程,延长诱导时间,以提高主要编辑效率.
- 与基准编辑方法相比,全面评估了非目标突变.
主要成果:
- 在 *E. coli* Nissle 1917.7 中实现了DNA删除 (25.0%),插入 (52.0%) 和替代 (66.7%) 的高效率.
- 与基础编辑技术相比,显著减少了目标外突变.
- 成功实施了一种DNA条码系统和一个无抗生素耐药基因的平台,用于工程益生菌.
结论:
- 开发的prime编辑系统提供了一个强大的和可访问的工具,用于精确的工程益生菌细菌.
- 这一战略为工程益生菌在诊断和治疗领域的先进应用铺平了道路.
- 为微生物应用CRISPR-Cas系统的进步提供了新的见解.
