克服抗体对人类乳酸脱酶的交叉反应

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 癌症生物学 癌症生物学

背景情况:

• 乳酸脱酶亚单元A (LD-A) 在癌症调控和治疗中至关重要.
• 由于抗体的交叉反应性,在人血清中开发准确的LD-A测定具有挑战性.

研究的目的:

• 开发一种特定的酶相关免疫溶剂测定 (ELISA) 测定人类血清中的LD-A.
• 确定和解决与商业LD-A抗体观察到的交叉反应的原因.

主要方法:

• 使用蛋白质测序和西式涂抹,对未知的交叉反应性蛋白质进行净化和表征.
• 生物信息学分析来选择在LD-A上最佳的表位位置,以开发抗体.
• 合成LD-A作为免疫原来产生特定抗体.

主要成果:

• 交叉反应蛋白被确定为IgG重链 (H链) 的N端.
• 十二种商业LD-A/LD-B抗体显示出与IgG/H链的显著交叉活性.
• 两种新的,针对LD-A的特异性抗体成功地使用合成产生.

结论:

• 成功产生了LD-A的特定抗体,使得精确的血清检测成为可能.
• 生物信息学工具对于优化免疫选择在抗体开发中是有价值的.
• 商业抗体与人类IgG的交叉反应性是LD-A免疫试验开发中的一个重要问题.