无抗体LC-HRMS/MS方法,用于从败血症患者的血清中同时量化NGAL,CRP和SAA

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 临床诊断 临床诊断 临床诊断

背景情况:

• 对蛋白质生物标记物的定量测定常见的是联结试验,但可能缺乏特异性.
• 液体染色学与高分辨率质谱学 (LC-HRMS/MS) 结合,提供了一个具体而准确的替代方案.
• 败血症生物标志物的量化对于及时诊断和治疗至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证一种强大的,无抗体的LC-HRMS/MS方法,用于对三种败血症生物标志物的多重定量:中性粒细胞凝酶相关性脂卡林 (NGAL),C反应蛋白 (CRP) 和人血清中的血清粉样蛋白A (SAA).
• 为缺乏国际标准的生物标志物建立可追溯的校准器.
• 为了证明该方法在现实世界样本中的适用性.

主要方法:

• 开发了一种使用三酸/异醇修改的蛋白质沉方法.
• 优化并行反应监测 (PRM) 采购用于敏感量化低丰度NGAL.
• 创建了可追溯到NGAL和SAA的国际单位系统的具有良好的特征的质校准器.

主要成果:

• 在ng/mL水平实现了NGAL的量化.
• 证明了方法的真实性和精度,变化系数 (CV%) 从1.6%到22.4%,偏差在-12.6%到+18.0%之间.
• 成功地将该方法应用于汇集的血清样本,证实了其有效性.

结论:

• 开发的无抗体LC-HRMS/MS方法为多重败血症生物标志物定量提供了可靠和准确的方法.
• 创建可追溯质校准器解决了对NGAL和SAA标准化的关键需求.
• 这项工作奠定了建立毒症诊断综合参考系统的基础.