再组合成的鱼肉类胰岛素样生长因子结合蛋白-2b1的产生及其对垂体细胞的作用
Takuto Miura1, Sota Watanabe2, Ryousuke Kizaki3
1Graduate School of Environmental Science, Hokkaido University, Kita 10, Nishi 5, Kita-ku, Sapporo, Hokkaido 060-0810, Japan.
马苏鱼中的胰岛素样生长因子结合蛋白-2b (Igfbp-2b) 被克隆并表达为重组蛋白. 这种重组Igfbp-2b1刺激了垂体细胞的生长激素释放,这表明鱼内分泌学中的新角色.
科学领域:
- 内分泌学 在内分泌学.
- 分子生物学分子生物学
- 鱼类生理学 鱼类生理学
背景情况:
- 胰岛素样生长因子结合蛋白 (Igfbp)-2b是鱼体中循环胰岛素样生长因子1 (Igf-1) 的关键载体.
- 了解Igfbp-2b的功能对于理解鱼类生长调节至关重要.
研究的目的:
- 为了克隆和表达鱼Igfbp-2b1.1. 的Igfbp-2b1.1.
- 为了研究重组鱼Igfbp-2b1 (rsIgfbp-2b1) 对从鱼垂体细胞中释放生长激素 (Gh) 的影响.
主要方法:
- 从马苏鱼肝脏中克隆了两种igfbp-2b对应物.
- 重组马苏鱼Igfbp-2b1 (rsIgfbp-2b1) 的细菌表达具有融合标签 (His-tag或Trx-His-tag).
- 使用Ni-亲和染色学和逆相高性能液体染色学在合成伙伴的酶分离后净化rsIgfbp-2b1.
- 在体外测定使用初级鱼垂体细胞培养来测量响应rsIgfbp-2b1和人类IGF-1的Gh释放.
主要成果:
- 马苏鱼Igfbp-2b1与其他鱼类的同类蛋白质具有高序列一致性.
- 再组合的鱼Igfbp-2b1已成功生产和净化.
- rsIgfbp-2b1显著增加了Gh从masu鱼垂体细胞的释放,以剂量依赖的方式,无论是用人类IGF-1还是不用人类IGF-1.
- rsIgfbp-2b1显示出对Gh释放的Igf-1-独立作用或抑制了局部垂体Igf-1的抑制作用.
结论:
- 重组鱼Igfbp-2b1 (rsIgfbp-2b1) 是一种功能性蛋白质,可以刺激生长激素的释放.
- rsIgfbp-2b1可能在调节鱼体Gh分泌方面发挥直接作用,独立于Igf-1.
- 这些发现有助于理解鱼类中生长激素和胰岛素类生长因子通路的复杂调节.
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