在悬浮HEK293细胞中产生的5型人类腺病毒细胞溶解和捕获过程的优化

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 病毒学 病毒学
• 生物加工是一种生物加工.

背景情况:

• 腺病毒 (Adv) 对于基因治疗和病毒载体疫苗至关重要.
• 对于Adv生产,需要可扩展,可持续的净化方法.
• 目前的方法需要优化,以提高效率和成本效益.

研究的目的:

• 评估聚酸盐表面活性剂在Adv净化中的高效细胞溶解.
• 评估Adv5在各种离子交换色谱介质上的结合能力.
• 为了确定可扩展的Adv净化最佳条件.

主要方法:

• 聚酸盐20 (PS20) 和聚酸盐80 (PS80) 的比较,用于HEK293细胞溶解.
• 在九个离子交换介质上对Adv5进行高通量静态结合能力 (SBC) 选.
• 对有希望的介质进行列上动态结合能力 (DBC) 验证.

主要成果:

• 无论PS20和PS80都将HEK293的活力降低到约13%,产生约1.62 × 10^9 ifu/mL的Adv5度.
• 萨尔托邦德Q膜和POROS 50HQ树脂显示出高的Adv5结合能力 (>1.0 × 10^13 vp/mL).
• 这些介质证明适合大规模的Adv净化.

结论:

• 聚酸盐是Adv净化过程中有效的溶解剂.
• 选择的离子交换介质为Adv5捕获提供了高容量.
• 该研究为开发强大且可扩展的Adv净化策略提供了基础.