从人类血液中分离出的冷保存PBMCs的线粒体呼吸分析
1Centre for Cardio-Metabolic Research in Africa, Division of Medical Physiology, Department of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine & Health Sciences, Stellenbosch University, Cape Town 8000, South Africa.
Cryobiology
|February 8, 2025
概括
在-80°C下3个月冷保存周围血液单核细胞 (PBMCs),不会影响它们的线粒体功能. 这一发现支持在临床研究中使用冷保存的PBMC用于未来的线粒体生物能分析.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 线粒体生理学线粒体生理学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- PBMC中的线粒体生物能学对于理解人类疾病至关重要.
- 临床研究通常需要冷保存样品,因为后勤方面的挑战.
- 目前关于冷保存对PBMC线粒体功能的影响的数据不一致.
研究的目的:
- 研究冷保存对人类PBMCs线粒体功能的影响.
- 为了确定冷保存的PBMC是否保留了其线粒体的生物能量能力,以便以后进行分析.
主要方法:
- 从人体全血中分离了周围血液单核细胞 (PBMC).
- 细胞被冷保存了三个月,温度为-80°C,在专门的介质中.
- 使用高分辨率呼吸计 (Oroboros仪器) 评估线粒体功能,并采用基质-解器-抑制剂-定位协议.
主要成果:
- 冷保存没有对关键的线粒体参数产生负面影响,包括常规呼吸,泄漏呼吸和与复杂I.I.相关的OXPHOS (氧化酸化).
- 诸如细胞染色体c反应,电子输送系统 (ETS) 容量,ROX (剩余氧耗) 和复杂的IV活性等基本功能保持不变.
- 三个月的冷保存后,线粒体合和N和S路径对ETS的贡献得到了保存.
结论:
- 人类PBMC线粒体完全正常运作,在经过3个月的冷保存在-80°C后结合起来.
- 冷保存是一种可行的存储PBMC的方法,用于随后的线粒体生物能分析.
- 这些发现验证了冷保存的PBMC在涉及线粒体功能的临床研究中的使用.
